Yazar "Güldağ, Gözde" seçeneğine göre listele

Listeleniyor 1 - 1 / 1
  • [ X ]
    Öğe
    The comparison of T98G cell response to trifluoperazine in 2D & 2.5D microenvironment
    (Adana Alparslan Türkeş Bilim ve Teknoloji Üniversitesi, 2023) Güldağ, Gözde; Yurtsever, Merve Çapkın
    Kanser-ilaç etkileşimlerini inceleyen çalışmalarda, 3D kültür sistemlerinin canlı organizmalardaki koşulları 2D kültür ortamından daha iyi taklit ettiği gösterilmiştir. 2.5D hücre kültürü ortamları, 3D hücre kültürlerinden yararlanmak ve dezavantajlarını azaltmak için geliştirilmiş kültürlerdir. Trifluoperazin (TFP), şizofreniyi tedavi etmek için kullanılan FDA onaylı bir antipsikotik ve antiemetik ilaçtır. Farklı kanser hücrelerinin çoğalmasını ve istilasını engellediği ve çeşitli kanser hücre hatlarında ve hayvan modellerinde hücre ölümüne neden olduğu gösterilmiştir. T98G hücreleri, bir insan glioblastoma hücre hattıdır ve rutin olarak kanser tedavi yöntemlerini geliştirmek için deneysel modeller olarak kullanılır. TFP ilacının T98G hücre hattı üzerindeki etkisini 2D ortamda inceleyen sınırlı sayıda çalışma mevcuttur. Bu tez çalışmasında, ilaç moleküllerinin in vitro olarak ucuz, hızlı ve in vivo hücre yanıtlarına daha benzer olmasını sağlayan bir kültür ortamı üretmesi amaçlanmıştır. T98G glioblastoma hücre dizisi, 2.5D ve 2D hücre kültürü sistemlerinde Trifluoperazin (TFP) varlığında ve yokluğunda hücre canlılığı ve morfolojisi açısından incelenmiştir. 2.5D hücre kültür sistemi için, genipin ve gliserolfosfat ile çapraz bağlı kitosan jeller üretilmiş ve T98G hücreleri doğrudan bu ıslak jeller üzerinde kültüre edilmiştir. Jellerin yüzey gözenek yapısı taramalı elektron mikroskobu ile incelenmiştir. Hücrelerin 2D ve 2.5D kültür sistemlerinde Trifluoperazin (1 µM, 2 µM, 4 µM, 6 µM ve 8 µM) ilaç molekülüne tepkisi, hücre canlılığının MTT analizi ve resazurin yöntemleri ile araştırılmıştır. Hücre çekirdeğinde meydana gelen değişimler DAPI boyama ile gösterilmiştir. TFP'nin T98G hücre hattı üzerindeki IC50 konsantrasyonları, TCPS üzerinde 2D kültür için MTT analizi ile 24 saat için 3,75 µM ve 48 saat için 2,57 µM olarak hesaplanmıştır. TFP'nin T98G hücre hattı üzerindeki IC50 konsantrasyonları, TCPS üzerindeki 2D kültür için resazurin analizi ile 24 saat için 2.86 µM ve 48 saat için 2.64 µM olarak hesaplanmıştır. MTT ve resazurin analiz sonuçlarından hesaplanan IC50 konsantrasyonlarının çok yakın olduğu sonucuna varılmıştır. DAPI boyaması da TFP'nin 24 saatlik uygulamasından sonra T98G hücrelerinde kontrol grubuna kıyasla yoğunlaşmış ve küçük çekirdek şeklini göstermiştir. 2.5D kitosan hidrojel üretimi için çözücü olarak %0,5 asidik asit, fiziksel ve kimyasal çapraz bağlayıcı olarak 100 µL gliserol fosfat (1 g/mL) ve 1 mM genipin seçilmiştir. T98G hücreleri 24 ve 48 saat boyunca bu hidrojeller üzerinde kültüre edilmiştir. Hücrelerin canlılığı resazurin analizi ile belirlenmiştir. 2.5D kitosan hidrojeller üzerinde kültüre edilen T98G hücreleri için TFP'nin IC50 konsantrasyonu 24 saatlik kültür için 2.37 µM ve 48 saatlik kültür için 1.94 µM olarak belirlenmiştir. Yapılan çalışmalar sonunda,2.5D'de üretilen hidrojellerin, 3D hücre kültürü ortamını taklit ettiği görülmüştür. 2.5D boyutlu hidrojeller üzerinde kültüre edilen hücrelerin IC50 dozunun 2D TCPS üzerinde kültüre edilen hücrelerin IC50 değerine göre daha düşük ve yakın çıkması T98G hücrelerinin 2.5D hidrojeller üzerinde TFP ilacına daha duyarlı olabilceğini göstermiştir. Sonuçlar üretilen hidrojellerin hücreler için in vitro ve in vivo benzeri kültür koşullarının oluşturulduğunu ve hücre-ilaç yanıtının in vivo'ya göre daha yakından incelenebileceğini göstermiştir.